L'essentiel de l'offre culturelle de Chisinau tient dans quelques rues autour du boulevard Ștefan cel Mare. Les théâtres, les salles de concert, les musées nationaux et les galeries sont à 10 minutes de marche les uns des autres. Les places restent bon marché par rapport à l'Europe occidentale, et la programmation mêle répertoire classique, créations locales et tournées venues de Roumanie. Les spectacles se donnent en roumain, et une partie de l'affiche est en russe.
Le Théâtre national Mihai Eminescu occupe un bâtiment néoclassique du boulevard Ștefan cel Mare et sa grande salle compte environ 800 places. Le Théâtre national d'opéra et de ballet Maria Bieșu assure la saison lyrique et chorégraphique, tandis que le Théâtre Eugène Ionesco défend un répertoire plus expérimental. La Salle avec orgue, installée dans l'ancien siège de la Banque d'État et inaugurée en 1978, accueille les concerts d'orgue et de musique de chambre. La Philharmonie nationale Serghei Lunchevici et le Palais national Nicolae Sulac complètent l'offre.
Le Musée national d'art de Moldavie, fondé en 1939, occupe un ancien lycée de jeunes filles signé Alexandru Bernardazzi, avec une annexe dans la maison Herța. Le Musée national d'histoire de la Moldavie conserve plus de 236 000 pièces. Le Musée national d'ethnographie et d'histoire naturelle est le plus ancien du pays et présente aussi bien des costumes régionaux que des collections naturalistes.
Le festival Mărțișor, créé en 1966, occupe les 10 premiers jours de mars et répartit ses concerts entre la Philharmonie, la Salle avec orgue, l'Opéra et le Palais national. Le festival d'opéra et de ballet Invită Maria Bieșu réunit depuis 1990 des chanteurs et des danseurs venus de plusieurs pays. Sur la scène actuelle, le groupe Zdob și Zdub, formé à Chisinau en 1994, mêle punk et folklore et a représenté 3 fois le pays à l'Eurovision.
L'Allée des classiques, aménagée en 1958 dans le jardin public Ștefan cel Mare, aligne une trentaine de bustes d'écrivains roumains et moldaves, parmi lesquels Mihai Eminescu, Ion Creangă et Dimitrie Cantemir. Le buste d'Alexandre Pouchkine, plus ancien, a été érigé en 1885. Le poète avait été exilé à Chisinau à partir de 1820, et la maison où il logeait est devenue un musée en 1948.
La soprano Maria Cebotari, née en 1910, a chanté à Dresde, à Berlin, à Vienne, à la Scala et à Covent Garden. La ville a aussi vu naître l'architecte Alexeï Chtchoussev, le réalisateur Lewis Milestone, le cryptologue William Friedman, la championne olympique du disque Lia Manoliu, le chanteur Dan Bălan et la chanteuse Cleopatra Stratan.